Mittels sekundärer Elektrosprayionisation und hochauflösender Massenspektrometrie wurde eine nichtinvasive Bestimmung der Pharmakokinetik (PK) von Ketamin, Propofol und Valproinsäure sowie deren Metaboliten in der Atemluft von Mäusen erzielt. Das PK‐Profil eines Medikaments beeinflusst dessen Wirksamkeit und Toxizität, weil es die Exposition und effektive Dosis bestimmt. Das Antidepressivum und Anästhetikum Ketamin und vier seiner Metaboliten wurden im Detail untersucht, und ihre PK gleichzeitig nach Verabreichen verschiedener sub‐anästhetischer Dosen von Ketamin bestimmt. Die Bioverfügbarkeit nach oraler Einnahme und intraperitonealer Injektion wurde ebenfalls untersucht. Im Gegensatz zu konventionellen Studien, bei denen selbst für PK‐Kurven niederer Auflösung viele Tiere geopfert werden müssen, ergibt die hier vorgestellte Echtzeit‐PK‐Bestimmung eine bisher unerreichte Zeitauflösung (10 s), und keines der Tiere musste getötet werden. Dies stellt somit einen wichtigen Schritt nicht nur für den Tierschutz, sondern auch eine große Kosten‐ und Zeitersparnis dar.