Die Anforderungen an Handballspielerinnen sind noch nicht genau genug definiert, insbesondere in Bezug auf die positionsspezifische Leistungsfähigkeit. Die optimale Vorbereitung auf ein Spiel erfordert individuelles Training, basierend auf den charakteristischen Anforderungen an jede einzelne Position. Ziel dieser Studie war daher die Ermittlung positionsspezifischer Unterschiede zwischen Handballspielerinnen, um positionsspezifische Trainingsempfehlungen formulieren zu können. Daten von 652 Spielerinnen aus deutschen Ligen aller Leistungsniveaus wurden mit einer Testbatterie für handballrelevante körperliche Leistungsfaktoren analysiert. Die Spielerinnen wurden im normalen Trainingsbetrieb und am gewohnten Trainingsort getestet. Untersucht wurden Laufen, Wurfgeschwindigkeit, Sprunghöhe, Reaktionsschnelligkeit, Grundlagenausdauer, Kraft der Arm- und Bauchmuskulatur sowie Flexibilität der ischiokruralen Muskulatur und des unteren Rückens. Signifikante Unterschiede zwischen den Positionen fanden sich in mehreren Parametern, wobei die Unterschiede auf den verschiedenen Leistungsniveaus mehr oder weniger stark ausgeprägt waren. So schnitten Torhüterinnen im Spitzensport beim Half-Cooper-Test (p < 0,001) am schlechtesten ab, während Außenspielerinnen die besten Werte aufwiesen. Spielerinnen auf Rückraumlinks und Rückraumrechts auf Spitzenniveau zeigten die höchste Wurfgeschwindigkeit (p < 0,001) und Sprunghöhe (p < 0,002). Torhüterinnen waren beim 20-m-Sprint in den Best- und Mittelwerten nach 5 Versuchen am langsamsten (p < 0,001; p < 0,010), waren aber zusammen mit den Außenspielerinnen sowie den Spielerinnen aller Rückraumpositionen beim 30-m-Sprint im Spitzensport überlegen (bester von 2 Versuchen, p < 0,001). Torhüterinnen schafften auch weniger Klimmzüge als Außen- und Rückraumspielerinnen auf Spitzenniveau (p < 0,003). Die vorliegende Studie zeigt positionsbezogene Unterschiede in Parametern der körperlichen Leistungsfähigkeit und legt damit eine Intensivierung des positionsspezifischen Trainings nahe, insbesondere für Torhüterinnen in der Vorbereitung und während der Saison. Zudem könnten positionsspezifische Tests in Auswahlverfahren angebracht sein.