Objective:. The aim of the present study was to investigate the changes in heme-oxygenase (HO)-carbon monoxide (CO)-cyclic guanosine monophosphate (cGMP) pathway in clacified rat vascular smooth muscle cells (VSMCs). Methods:. Calcification of cultured rat VSMCs was induced by incubation of VSMCs with -glycerophosphate. Cellular calcium content, ALP activities and 45Ca uptake were measured. HO activity, HbCO formation and content of cGMP in VSMCs were determined. Immunocytochemistry for HO-1 expression was observed. Results:. In comparison of control VSMCs, the cellular calcium content, ALP activity and 45Ca uptake in calcified VSMCs were obviously increased. Immunocytochemistry showed that HO-1 expression was weak and not well distributed in calcified cells as compared to non-calcified VSMCs, but interestingly, there was stronger staining in calcified nodules than in VSMCs. Compared with VSMCs, HO-1 activity in calcified cells decreased by 42.7% [36.4 2.8 pmol (mg Pr h)1 vs 63.5 5.3 pmol (mg Pr h)1, p 0.01], and HbCO formation decreased by 39.2% (3.38 0.69 mol/mg Pr vs 5.56 0.48 mol/mg Pr, p 0.05). The cGMP content in calcified VSMCs was 78.1% lower than that of non-calcified VSMCs (4.3 0.51 vs 19.6 1.2 pmol/mg, p 0.01). Conclusion:. The results showed that HO-CO-cGMP pathway in calcified vascular cells obviously changed, which might contribute to disturbance of vascular function.
Methoden:. Die Kalzifikation der vaskulren Muskelzellen durch Inkubation der vaskulren Muskelzellen von Ratten mit -Glycerophosphale. Der zellulre Calcium-Gehalt, die ALP-Aktivitten und die 45Calcium-Deposition wurden gemessen. HO-Aktivitten, die HbCO-Formation und der cGMP-Gehalt in den vaskulren Muskelzellen wurden bestimmt. Der Ausdruck der Immunocyto-Chemie fr HO-1 wurde beobachtet. Ergebnisse:. Im Vergleich zu kontrollierten vaskulren Muskelzellen stiegen der zellulre Calcium-Gehalt, die ALP-Aktivitten und die 45Ca-Deposition in den kalzifizierten vaskulren Muskelzellen deutlich an. Die Immunocyto-Chemie zeigt, dass der HO-1- Ausdruck in den kalzifizierten Zellen im Vergleich zu den nichtkalzifizierten Zellen ist, und nicht im Gleichgewicht hielt. Interessanterweise ist jedoch das Positiv bei kalzifizierten Nodi strker als das in vaskulren Muskelzellen. Im Vergleich mit vaskulren Muskelzellen nahm die Aktivitt von HO-1 in kalzifizierten Zellen um 42,7% ab [36,4 2,8 pmol (mg Pr h)1 vs 63,5 5,3 pmol (mg Pr h)1, p 0,01]. Whrend sich die HbCO-Formation um 39,2% (3,38 0,69 mol/mg Pr vs 5,56 0,48 mol/mg Pr, p 0,05) verringerte. Der cGMP-Gehalt in kalzifizierten Zellen war um 78,1% (4,3 0,51 vs 19,6 1,2 pmol/mg Pr, p 0,01) niedriger als in nicht kalzifizierten Zellen. Schlussfolgerung:. Die Ergebnisse zeigen eine deutliche Vernderung von HOCO-cAMP-pathway in den kalzifizierten vaskulren Zellen, was eine Unordnung der vaskulren Funktion erklren knnte. Das Ziel der vorliegenden Studie ist die Erforschung der Vernderungen von heme-oxygenase (HO)-carbon monoxide (CO)-cyclic guanosine monophosphate (cGMP) pathway in den vaskulren Muskelzellen.