Background:. Evaluation of radiation-induced apoptosis in T-lymphocytes was developed for human medicine in order to predict the sensitivity of individual patients to radiation therapy and has regular use in cases of suspected hypersensitivity. A major goal of the present study was to evaluate the usefulness of the apoptosis assay in veterinary medicine for application in radiation sensitivity testing. The main goal was to examine potential changes in sensitivity of T-lymphocytes to radiation-induced apoptosis during the course of radiation treatment. This is a clear example of the advantageous use of spontaneous canine tumors to augment human cancer research. Material and Methods:. Blood was collected in heparin tubes, diluted 1 : 10 in RPMI medium, irradiated with X-rays and incubated for 48 h. T-lymphocytes were labeled using FITC-conjugated antibodies, erythrocytes were lysed, and DNA stained with propidium iodide. For cell analysis, a Becton Dickinson FACScan flow cytometer was used. Radiation-induced apoptosis in T-lymphocytes was quantified. Blood samples from tumor-bearing dogs were taken before the first fraction and at the end of radiation therapy. Results:. Apoptosis in lymphocytes is dependent on donor age and donor weight. Tumor-bearing dogs when compared with healthy dogs showed no significant differences in levels of induced apoptosis. No significant changes were seen in the levels of radiation-induced apoptosis in blood taken before, during, or after radiation therapy. Conclusion:. The leukocyte apoptosis assay can be successfully applied to canine patients, and a wide spectrum of sensitivities to radiation-induced apoptosis is observed. The sensitivity of a patients peripheral blood T-lymphocytes to radiation-induced apoptosis does not change as a result of the trauma of radiotherapy during the course of tumor treatment.
Hintergrund:. Die Bestimmung der strahleninduzierten Apoptose bei Lymphozyten wurde fr die Humanmedizin zur Prognose der individuellen Strahlenempfindlichkeit einzelner Patienten entwickelt, wo der Test regelmig bei Verdacht auf Hypersensibilitt eingesetzt wird. Das erste Ziel dieser prospektiven Studie war die Bestimmung der Przision und Reproduzierbarkeit dieses Tests bei Hunden als Voraussetzung fr detailliertere Fragestellungen. Das Hauptziel war die Bestimmung einer mglichen Beeinflussung der strahleninduzierten Apoptose durch die Radiotherapie selbst durch Blutentnahmen zu verschiedenen Zeitpunkten. Material und Methodik:. Das heparinisierte Blut wurde mit RPMI-Medium verdnnt (1 : 10). Diese Lsung wurde mit Rntgenstrahlen bestrahlt und fr 48 h inkubiert. Daraufhin wurden die T-Lymphozyten mit FITC-konjugierten Antikrpern markiert, die vorhandenen Erythrozyten lysiert und die DNA mit Propidium-Jodid gefrbt. Fr die Analyse der Zellen wurde ein Becton-Dickinson- FACScan-Durchflusszytometer verwendet. Die strahleninduzierte Apoptose wurde quantifiziert. Die Blutproben von Hunden mit spontanen Tumoren wurden vor der ersten Fraktion und am Ende der Strahlentherapie entnommen. Ergebnisse:. Die Apoptoserate der Lymphozyten ist von der Dosis (Abbildungen 1 und 4), vom Alter (Abbildungen 3 und 5) und vom Gewicht (Abbildung 7) der Patienten abhngig. Hunde mit Tumoren zeigten gegenber gesunden Hunden keine signifikanten Unterschiede in der strahleninduzierten Apoptose vor, whrend oder nach der Strahlentherapie (Abbildung 6). Schlussfolgerung:. Der Leukozyten-Apoptose-Assay erreicht fr Hunde die Reproduzierbarkeit wie fr Humanpatienten, wenn eine hundespezifische Alterskorrektur angewendet wird. Das Spontantumormodell beim Hund kann in Studien multiple Blutentnahmen erfordern, die Studien am Menschen sinnvoll ergnzen.