We have established a transposon mutagenesis procedure for the moderate halophile Halomonas eurihalina, a bacteria that produces an exopolysaccharide (EPS) of considerable biotechnological interest. We used suicide plasmids pUT and pSUP102 to introduce the transposons mini-Tn5 and Tn1732 into H. eurihalina via Escherichia coli mediated conjugation. Southern hybridization analysis demonstrated that insertions of the transposon mini-Tn5 into H. eurihalina occurred randomly at single sites in the chromosome, whereas Tn1732 insertion also took place at random, but simultaneously, at several sites. Phenotypic analysis revealed that different mutants were generated by using mini-Tn5. The isolation of exopolysaccharide-defective strains is the first stage towards carrying out genetic studies on EPS production by this microorganism.
Mutagenese de transposon chez Halomonas eurihalina.Nous avons etabli un procede de mutagenese de transposon pour Halomonas eurihalina, une bacterie moderement halophile qui produit un exopolyoside (EPS) dont l'interet biotechnologique est considerable. Nous avons utilise les plasmides suicides pUT et pSUP102 pour introduire les transposons mini-Tn5 et Tn1732 dans H. eurihalina via la conjugaison au moyen de Escherichia coli. L'analyse de l'hybridation, selon Southern, demontre que les insertions du transposon mini-Tn5 a lieu au hasard a des sites uniques du chromosome alors que l'insertion de Tn1732 a lieu, au hasard, simultanement dans plusieurs sites. L'analyse phenotypique revele que des divers mutants sont generes au moyen du transposon mini-Tn5. L'isolement de souches EPS-defectives est la premiere etape des etudes genetiques de la production de EPS par cette bacterie. (C) 2000 Editions scientifiques et medicales Elsevier SAS