Objective. – Among potential virulence factors of Candida albicans, are hydrophobic hyphal surface proteins.Methods. – A cDNA library was therefore constructed from germ tube mRNAs, and immunoscreened with a rabbit immune serum raised against purified hydrophobic hyphal proteins.Results. – Analysis of the nucleotide and deduced amino acid sequences of one selected clone revealed an open reading frame encoding a protein of 196 amino acid residues with a molecular mass of 25-kDa. Significant homology was shown with a class of thiol-specific antioxidant (Tsa) like enzymes present in prokaryotes and eukaryotes. A 73% identity was obtained with Saccharomyces cerevisiae Tsa1p. Reverse transcription-quantitative PCR showed the expression of C. albicans TSA-like gene in both blastoconidia and germ tubes, with a 15-fold overexpression in germ tubes. However, in vitro studies using anti-peptide antibodies and confocal microscopy demonstrated the presence of the corresponding protein at the surface of the hyphal part of germ tubes exclusively.Conclusion. – In conclusion, this protein which was synthesized in both blastoconidia and germ tubes, was expressed at the surface of the invasive forms in vitro, but also in vivo in a murine model. Therefore, it could play a role in pathogenesis of C. albicans.
Objectif. – Les protéines hyphales hydrophobes de surface comptent parmi les facteurs de virulence potentiels de Candida albicans.Méthodes. – Ainsi, une banque d'ADNc a été construite à partir d'ARNm de tubes germinatifs, et immunocriblée avec un immunsérum de lapin dirigé contre les protéines hyphales hydrophobes purifiées.Résultats. – L'analyse de la séquence nucléotidique et de la séquence d'acides aminés déduite de l'un des clones sélectionné a révélé un cadre ouvert de lecture codant une protéine de 196 acides aminés ayant une masse moléculaire de 25 kDa. Une homologie significative de cette séquence a été montrée avec les séquences d'une classe d'enzymes antioxydantes, thiol-spécifiques, présentes chez les procaryotes et les eucaryotes. Une identité de 73% a été obtenue avec la protéine Tsa1 de Saccharomyces cerevisiae. La RT-PCR quantitative a montré l'expression du gène TSA-like de C. albicans à la fois pour la forme blastospore et pour la forme tube germinatif, avec une sur-expression de 15 fois pour ces tubes germinatifs. Des études complémentaires in vitro, utilisant des anticorps anti-peptides et la microscopie confocale, ont démontré la présence de la protéine correspondante exclusivement à la surface de la partie hyphale des tubes germinatifs.Conclusion. – En conclusion, nous avons révélé que cette protéine Tsa-like de C. albicans était synthétisée à la fois par les blastospores et les tubes germinatifs et qu'elle était exprimée à la surface des formes invasives in vitro, mais aussi in vivo dans un modèle murin. Elle pourrait donc jouer un rôle dans la pathogénicité de C. albicans.