Les recherches que nous avons effectuées ont pour but d’élucider le problème de la rapide clairance des hématies transfusées en nous fondant sur nos connaissances actuelles des mécanismes de la mort programmée de ces cellules.Nous avons mis au point de nouveaux critères de viabilité des hématies essentiellement fondés sur l’utilisation de la cytométrie en flux. Associés aux critères classiques de dosage de l’ATP et de la mesure de l’hémolyse, ils ont été appliqués à des hématies stockées en milieu SAGM pendant six semaines.L’application d’un procédé original d’érythrophagocytose in vitro a montré qu’une importante proportion d’hématies étaient phagocytées alors qu’elles ne présentaient aucun des signaux classiques de sénescence et de phagocytose avec, en particulier, l’absence de désialylation, marqueur de capture, un très faible taux d’externalisation de la phosphatidylsérine, marqueur de phagocytose et la persistance du récepteur CD47, signal d’antiphagocytose. En outre, l’ATP était encore présent dans les cellules. La solution de l’énigme est venue de la microscopie électronique de balayage qui a révélé la présence de quantités importantes de sphéroéchinocytes, seules hématies phagocytables dont il reste, à présent, à découvrir l’origine.
In light of recent results on the mechanism of programmed cell death of human red blood cells (RBC), the aim of the present study was to solve the enigma of the rapid clearance of transfused RBCs.We describe new criteria of RBC viability founded on the use of flow cytometry. They were applied, in association with the classical ones: ATP and hemolysis measurements, to RBCs stored in SAGM medium for 42 days.Application of an original method of flow cytometric quantitation of in vitro erythrophagocytosis showed that an important proportion of stored RBCs were phagocytized although the following classical signals for phagocytosis were absent, i.e.: desialylation, phosphatidylserine exposure in the outer leaflet of the RBC membrane, loss of CD47 receptor, an antiphagocytosis signal. In addition, ATP was still present and hemolysis was very low. This enigma was solved by the use of scanning electron microscopy, which showed the disappearance of discocytes and the presence of an important proportion of spheroechinocytes, which are the phagocytable forms of RBCs. The mechanism of this dramatic morphological transformation remains to be elucidated.