introduction. The Elisa technique has been the method of choice for diagnosis of citrus tristeza virus (CTV) during recent years. However, it was sometimes reported to be not sensitive enough to detect the virus before the onset of decline symptoms. The development of diagnostic methods based on genome amplification appears very attractive: recent methods of DNA amplification in vitro, such as the polymerase chain reaction (PCR) have proven to be of a much higher sensitivity than Elisa with various viruses, including CTV. In this work, a diagnostic assay for CTV based on IC/RT-PCR that combines the simplicity of Elisa with the advantages of a DNA-based method is presented. materials and methods. Infected plant material used included selected isolates of CTV from various origins. The primers and fluorescent probes were designed, taking the sequence of the coat protein gene of the well characterised T36 quick decline strain of CTV from Florida. A simplified IC/RT-PCR assay was designed. After PCR amplification, the electrophoretic analysis of the results was substituted for the measurement of the fluorescence. The PCR results were compared with those of the Elisa method used, in parallel, with the same samples. results and discussion. The PCR assay enabled the detection of the virus in all the Elisa positive samples, as well as in an additional 20% of the samples that were Elisa negative. There-fore, the new method tested has a greater sensitivity than the Elisa assay and is a better tool for disease diagnosis.introduction. Le test Elisa a ete la methode preferentiellement utiliseee, ces dernieres annees, pour diagnostiquer le virus de la tristeza des agrumes (CTV). Cependant, cette technique s'est parfois revelee trop peu sensible pour detecter le virus avant l'observation des symptomes. Les methodes de diagnostic basees sur l'amplification du genome sont attractives : de recentes methodes d'amplification du DNA in vitro, comme la technique PCR, se sont revelees beaucoup plus sensibles chez de nombreux virus, dont celui du CTV, que le test Elisa. Dans ces travaux, une technique de diagnostic du CTV, basee sur la methode IC/RT-PCR, est presentee. Elle combine la simplicite du test Elisa avec les avantages de methodes utilisant le DNA. materiel et methodes. Des echantillons infectes par des isolats de CTV de diverses origines ont ete collectes. Les amorces et les sondes fluorescentes ont ete choisies en se basant sur la sequence du gene codant pour la proteine de l'enveloppe du CTV de race T36, de Floride. Une methode IC/RT-PCR simplifiee a ete elaboree. Apres amplification par PCR, l'analyse electrophoretique des resultats a ete substituee par la mesure de la fluorescence. Les resultats obtenus avec cette technique ont ete compares avec ceux du test Elisa utilise en parallele sur les memes echantillons. resultats et discussion. La technique PCR a permis de detecter des virus non seulement dans tous les echantillons Elisa-positifs, mais encore dans 20 % de ceux trouves Elisa-negatifs. La methode testee, plus sensible que le test Elisa, s'avere un meilleur outil de detection de la maladie.introduccion. Se ha utilizado, durante estos ultimos anos, preferentemente el test Elisa como metodo para diagnosticar el CTV. No obstante, esta tecnica se ha mostrado a veces muy poco sensible para detectar el virus antes de la observacion de los sintomas. Los metodos de diagnostico basados en la amplificacion del genoma son bastante atractivos : recientes metodos de amplificacion del DNA in vitro, como la tecnica PCR, se han mostrado mucho mas sensibles en numerosos virus, y entre ellos el CTV, que el metodo Elisa. Lo que se presenta en estos trabajos, es una tecnica de diagnostico del CTV basada en el metodo IC/RT-PCR. Se combina asi la simplicidad del test Elisa con las ventajas de metodos que utilizan el DNA. material y metodos. Se tomaron muestras infectadas por aislados de CTV de diferentes origenes. Los cebos y las sondas fluorescentes se escogieron basandose en la secuencia del gen que codifica la proteina de la envoltura del CTV de raza T36 de Florida. Se elaboro un metodo IC/RT-PCR simplificado. Tras amplificacion por PCR, el analisis electroforetico de los resultados se sustituyo por la medida de la fluorescencia. Se compararon los resultados obtenidos mediante esta tecnica con los del test Elisa que se utilizo paralelamente en las mismas muestras. resultados y discusion. La tecnica PCR ha permitido detectar virus no solo en todas las muestras Elisa-positivas, sino tambien en el 20% de Elisa-negativas. El metodo probado, mas sensible que el test Elisa, se revela como un mejor instrumento para detectar la enfermedad.